人結(jié)腸癌細(xì)胞系：SW48細(xì)胞，SW480細(xì)胞，CACO-2細(xì)胞，SW620細(xì)胞，HCT-8細(xì)胞，HCT/V細(xì)胞，HCT-116細(xì)胞，LoVo細(xì)胞，HRT-18細(xì)胞，HT-29細(xì)胞等

人宮頸癌細(xì)胞系：hela細(xì)胞，HT-3細(xì)胞，C33A細(xì)胞，SN12C細(xì)胞，SKG-IIIa細(xì)胞，Hela S3細(xì)胞，DoTc2-4510細(xì)胞，Ca Ski細(xì)胞 ，ME-180細(xì)胞等

DC2.4細(xì)胞株  MC38細(xì)胞株，MLE-12細(xì)胞，bEND.3細(xì)胞 HT-22細(xì)胞，HK-2細(xì)胞 THP-1細(xì)胞 WRO細(xì)胞 FRO細(xì)胞 Molt-4細(xì)胞系 SH-SY-5Y細(xì)胞 U87-MG細(xì)胞

以上細(xì)胞系，慧穎細(xì)胞庫(kù) 大賣

凡購(gòu)買我公司任何細(xì)胞株，我司將贈(zèng)送德國(guó)SERANA*胎牛血清20ML-50ML試用裝一瓶

更多好禮相送，咨詢： ！

慧穎細(xì)胞庫(kù)提供UWB1.289細(xì)胞|ATCC來(lái)源|科研用人卵巢癌細(xì)胞，復(fù)蘇細(xì)胞、凍存細(xì)胞均可提供。全國(guó)各地均可發(fā)貨，全國(guó)統(tǒng)一價(jià)格，原至澳門、香港、新疆、內(nèi)蒙古、福建、寧夏等地區(qū)。提供SHIN3細(xì)胞的來(lái)源背景|特征特性|生長(zhǎng)狀態(tài)|細(xì)胞形態(tài)|代數(shù)|價(jià)格|培養(yǎng)條件|操作注意事項(xiàng)|售后說(shuō)明等?；鄯f400多種類細(xì)胞株細(xì)胞系，20株耐藥株，傳代次數(shù)少，活力高，*，深得客戶信賴！

乳腺癌細(xì)胞：HCC1395細(xì)胞，人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞  

            SUM149PT細(xì)胞，人乳腺癌細(xì)胞

            SUM1315M02，人乳腺癌細(xì)胞

            L56BRC1細(xì)胞，人乳腺癌細(xì)胞

            HCC1599細(xì)胞，人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞 

卵巢癌細(xì)胞：UWB1.289細(xì)胞，人卵巢癌細(xì)胞

            IOSE80細(xì)胞，人正常上皮卵巢細(xì)胞

            KGN細(xì)胞，人卵巢癌細(xì)胞

            Hey細(xì)胞，人卵巢癌細(xì)胞

            A2780細(xì)胞，人卵巢細(xì)胞

            COV434細(xì)胞，人卵巢顆粒細(xì)胞

            SHIN-3細(xì)胞，人卵巢透明癌細(xì)胞

            HOC-2細(xì)胞，人卵巢透明癌細(xì)胞

            HAC-2細(xì)胞，人卵巢囊腺癌細(xì)胞

            OVK18細(xì)胞，人卵巢癌細(xì)胞

            OVCAR4細(xì)胞，人卵巢癌細(xì)胞

            OVCAR5細(xì)胞，人卵巢癌細(xì)胞

UWB1.289細(xì)胞|ATCC來(lái)源|科研用人卵巢癌細(xì)胞（細(xì)胞培養(yǎng)中常見(jiàn)的生物污染類型有7種，分別是細(xì)菌污染、支原體污染、原蟲(chóng)污染、黑膠蟲(chóng)污染、真菌污染、病毒污染以及非細(xì)胞污染，那么他們污染細(xì)胞的特點(diǎn)分別是什么呢？怎樣能夠減少污染現(xiàn)象的發(fā)生？）

1-細(xì)菌

細(xì)菌污染常見(jiàn)的有大腸桿菌，葡萄球菌等。細(xì)菌污染較易發(fā)現(xiàn)，在普通倒置顯微鏡下為黑色細(xì)沙狀，培養(yǎng)液一般會(huì)在短時(shí)間內(nèi)變黃，有時(shí)靜置的培養(yǎng)液不混，稍加震蕩會(huì)有很多混濁物漂起。顯微鏡下可見(jiàn)培養(yǎng)液中有大量圓球狀顆粒物漂浮，有時(shí)在細(xì)胞表面及周圍有大量細(xì)菌存在，細(xì)胞停止生長(zhǎng)并有中毒表現(xiàn)。

處理：①在培養(yǎng)液中加入相應(yīng)的抗生素，能夠預(yù)防絕大多數(shù)的細(xì)菌污染。

2-真菌

真菌污染是細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中zui常見(jiàn)的一種，尤其梅雨季節(jié)快要到了，進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)更易污染。污染細(xì)胞的多為煙曲霉、黑曲霉、毛霉菌、孢子霉、白念珠菌、酵母菌等。霉菌污染后多數(shù)在培養(yǎng)液中形成白色或淺黃色漂浮物。一般肉眼可見(jiàn)，較易被發(fā)現(xiàn)，短期內(nèi)培養(yǎng)液多不混濁，倒置顯微鏡下可見(jiàn)于細(xì)胞之間縱橫交錯(cuò)穿行的絲狀、管狀、及樹(shù)枝狀菌絲，并懸浮飄蕩在培養(yǎng)液中。

很多菌絲在高倍鏡可見(jiàn)到有鏈狀排列的菌珠；念珠菌或酵母菌形態(tài)呈卵形，散在細(xì)胞周邊和細(xì)胞之間生長(zhǎng)。鏡下看時(shí)，要將培養(yǎng)瓶用酒精棉球擦干凈，以防止與瓶外尤其瓶底外面生長(zhǎng)的菌絲相混淆。

真菌污染后，細(xì)胞生長(zhǎng)變慢，但zui后由于營(yíng)養(yǎng)耗盡及毒性作用而使細(xì)胞脫落死亡。真菌生長(zhǎng)的比較慢，不象細(xì)菌那么容易被發(fā)現(xiàn)，但是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細(xì)胞就被污染了，也很難救活了。

3-支原體

支原體的大小介于細(xì)菌和病毒之間，是一種獨(dú)立生活的微生物。對(duì)熱敏感，對(duì)一般抗生素不敏感。支原體的形態(tài)多變，多吸附在細(xì)胞表面和細(xì)胞之間。電鏡下觀察，中心有高密度的密集顆粒，橫斷面與細(xì)胞微絨毛相似。

因國(guó)內(nèi)的血清大多數(shù)都沒(méi)有做支原體陰性檢測(cè)，而支原體又是牛血清中zui常見(jiàn)的微生物之一。支原體污染細(xì)胞后，培養(yǎng)液輕微發(fā)生混濁．但細(xì)胞變化不顯著，隨著細(xì)胞的培養(yǎng)會(huì)慢慢死亡。

支原體污染檢測(cè)（熒光染色法）：DNA和與DNA特異性結(jié)合的熒光染料結(jié)合，使得支原體的DNA著色，然后用熒光顯微鏡觀察。鏡下支原體為散在于細(xì)胞同圍或附于細(xì)胞膜表面的亮綠色小點(diǎn)。

解決：

1）抗生素排除法：支原體污染預(yù)防比解決好。如果不小心污染后，可加入高濃度抗生素（常規(guī)使用的5倍濃度）作用24-48小時(shí)，再換入常規(guī)培養(yǎng)液，但該法不保證有效。推薦用量：慶大霉素 200μg/ml ,四環(huán)素10μg/ml ，卡那霉素50μg/ml 。

2）加溫除菌：支原體不耐熱，可以對(duì)支原體污染的細(xì)胞熱處理除菌。因高溫對(duì)細(xì)胞本身也會(huì)產(chǎn)生一定影響，故熱處理前需先進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)，確定對(duì)細(xì)胞影響zui小而能zui大程度的殺死支原體的時(shí)間。

4-黑膠蟲(chóng)

黑膠蟲(chóng)的存在目前尚有爭(zhēng)議，其在低倍下為黑色點(diǎn)狀，高倍下可看見(jiàn)黑色的小蟲(chóng)游來(lái)游去，培養(yǎng)液也是不渾的，對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)不會(huì)有明顯影響，在細(xì)胞增殖旺盛之后會(huì)自然消失，除更換血清外無(wú)須特殊處理。

5-原蟲(chóng)

培養(yǎng)液可輕微渾濁，顯微鏡下那些細(xì)小的點(diǎn)狀物數(shù)量非常多，輕微活動(dòng)，細(xì)胞雖然可以生長(zhǎng)但繁殖速度卻明顯減慢，而且細(xì)胞狀態(tài)不好，邊緣不清楚，細(xì)胞不透亮。他們與細(xì)胞可共生但會(huì)與細(xì)胞爭(zhēng)奪營(yíng)養(yǎng)。這種共生是非常普遍的，但他們的數(shù)量小，細(xì)胞站優(yōu)勢(shì)所以不會(huì)影響到細(xì)胞的正常生長(zhǎng)，只有當(dāng)他們到達(dá)一定的數(shù)量時(shí)就會(huì)影響到細(xì)胞的生長(zhǎng)，zui終形成惡性循環(huán)。

6-病毒

組織細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，如果沒(méi)有除去潛在的病毒，就會(huì)產(chǎn)生病毒污染。目前，從原代猴腎細(xì)胞的培養(yǎng)中已發(fā)現(xiàn)不少于20種血清性病毒。 盡管病毒污染的細(xì)胞不影響原代培養(yǎng)，但生產(chǎn)疫苗是不安全的。因此，潛在病毒是細(xì)胞大量生產(chǎn)和疫苗、干擾素等生物制品制作中的難題。

7-非同種細(xì)胞污染

即細(xì)胞交叉污染，由于細(xì)胞培養(yǎng)操作時(shí)各細(xì)胞株所需的器材和溶液沒(méi)有嚴(yán)格分開(kāi)，往往會(huì)使一種細(xì)胞被另一種細(xì)胞污染。目前，世界上已有幾十種細(xì)胞都被HeLa細(xì)胞所污染，致使許多實(shí)驗(yàn)宣告無(wú)效。非細(xì)胞培養(yǎng)物所造成的化學(xué)成分的污染也偶有發(fā)生，大多是由于細(xì)胞培養(yǎng)所需物品清洗消毒不*而帶入一些有毒化學(xué)物質(zhì)所致。

污染是細(xì)胞培養(yǎng)的大敵，預(yù)防和避免污染是成功培養(yǎng)細(xì)胞的關(guān)鍵之一。危機(jī)意識(shí)要貫徹實(shí)驗(yàn)的始終，否則不僅浪費(fèi)時(shí)間，而且浪費(fèi)人力、物力，甚至造成無(wú)法彌補(bǔ)的損失。

（如何預(yù)防細(xì)胞培養(yǎng)的污染和清除這些污染物呢？）慧穎 細(xì)胞庫(kù) 技術(shù)為您解答：

一、污染的預(yù)防

預(yù)防是防止細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中發(fā)生污染的辦法。只有預(yù)防工作做在前，才能將發(fā)生污染的可能性降到zui小程度。一般預(yù)防可從以下幾方面著手：

1-從操作者做起

1操作者責(zé)任心要強(qiáng)，要細(xì)心穩(wěn)重，操作技術(shù)要熟練。進(jìn)無(wú)菌室前要用肥皂洗手或用5%新潔爾滅浸泡5分鐘，按規(guī)定穿隔離衣。進(jìn)入后關(guān)好門，坐下來(lái)盡量少走動(dòng)。工作開(kāi)始要先用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。事先要嚴(yán)格檢查器材、溶液和培養(yǎng)物，不要把污染品或未經(jīng)消毒的物品帶入無(wú)菌室內(nèi)，更不能隨便使用，以免造成大批污染。

2、操作者動(dòng)作要輕，必須在火焰周圍無(wú)菌區(qū)內(nèi)打開(kāi)瓶口，并將瓶口轉(zhuǎn)動(dòng)燒灼。操作時(shí)盡量不要談話，若打噴嚏或咳嗽應(yīng)轉(zhuǎn)向背面。

3、操作時(shí)要常更換吸管，切勿一根吸管做到底。一旦發(fā)現(xiàn)吸管口接觸了手和其他污染物品應(yīng)棄去。實(shí)驗(yàn)完畢及時(shí)收拾，保持實(shí)驗(yàn)室清潔整齊，zui后用消毒水浸泡的紗布擦臺(tái)面。

2-從物品、用品消毒滅菌著手

細(xì)胞培養(yǎng)所用物品清洗、消毒要*，各種溶液滅菌除菌要仔細(xì)，并在無(wú)菌試驗(yàn)陰性后才能使用。操作室及剩余的無(wú)菌器材要定期清潔消毒滅菌。

3-防止細(xì)胞交叉污染

在進(jìn)行多種細(xì)胞培養(yǎng)操作時(shí)，所用器具要嚴(yán)格區(qū)分，做上標(biāo)記便于辨別。并按順序進(jìn)行操作，避免一起進(jìn)行時(shí)易發(fā)生混亂。

在進(jìn)行換液或傳代操作時(shí)，注射器和滴管不要觸及細(xì)胞培養(yǎng)瓶瓶口，以免把細(xì)胞帶到培養(yǎng)液中污染其他細(xì)胞。

所有細(xì)胞一旦購(gòu)置，或從別處引入，或自己建立，均應(yīng)及早留種凍存，一旦發(fā)生污染可棄之復(fù)蘇，重新培養(yǎng)。

二、污染的清除

培養(yǎng)細(xì)胞一經(jīng)污染，多數(shù)較難處理。如果污染細(xì)胞價(jià)值不大，宜棄之；有細(xì)胞株留存的或可購(gòu)置的，可在尋找原因后*消毒操作室，復(fù)蘇或重新購(gòu)置細(xì)胞，再培養(yǎng)。若污染細(xì)胞價(jià)值較大，又難于重新得到，可采取以下辦法清除。

1-使用抗生素

抗生素對(duì)殺滅細(xì)菌較有效。聯(lián)合用藥比單獨(dú)用藥效果好。預(yù)防用藥比污染后再用藥效果好。預(yù)防用藥一般用雙抗生素（青霉素100u/mL加鏈霉素100μg/mL），污染后清除用藥需采用大于常用量5～10倍的沖洗法，于加藥后作用24～48小時(shí)，再換常規(guī)培養(yǎng)液。此法在污染早期可能有效。所用抗生素品種除青霉素、鏈霉素外，還可用慶大霉素、卡那霉素、多粘菌素、四環(huán)素、制霉菌素等。常用400～800μg/mL卡那霉素或200μg/mL四環(huán)素處理，每隔2～3日換液1次，傳1～2代進(jìn)行治療。近年來(lái)有報(bào)道，4-氟，2-羥基喹啉（Ciprofloxacin,Cip）、截耳素衍生物（Pleu-romutilinderivative,BM-Cyclin2:BM-1和四環(huán)素衍生物（BM-2）等三種抗生素單用或合用對(duì)殺滅支原體有效。這三種抗生素均用PBS配成250濃縮液，-20℃保存?zhèn)溆?，使用濃度Cip為10μg/mL，BM-1為10μg/mL，BM-2為5μg/mL。使用時(shí)先吸除污染的培養(yǎng)液，加入含BM-1的RPMI1640培養(yǎng)液，3天后再吸除培養(yǎng)液，加入含BM-2的RPMI1640培養(yǎng)液，培養(yǎng)4天，如此連續(xù)3個(gè)輪次，直至用33258熒光染色鏡檢證明已清除支原體后，再加正常培養(yǎng)液培養(yǎng)傳代3-4次。

2-使用支原體特異性血清

用5%的兔支原體免疫血清（血凝效價(jià)1:320以上）可去除支原體污染，因特異抗體可抑制支原體生長(zhǎng)，故經(jīng)抗血清處理后11天即轉(zhuǎn)為陰性，并且5個(gè)月后仍為陰性。但此法比較麻煩，不如用抗生素方便、經(jīng)濟(jì)。

3-加溫處理

將污染的組織培養(yǎng)物放在41℃培養(yǎng)18小時(shí)，可殺死支原體，但對(duì)細(xì)胞有不良影響。所以在處理前要進(jìn)行預(yù)試驗(yàn)，摸索能zui大限度殺死支原體又對(duì)細(xì)胞影響zui小的加熱時(shí)間。此法有時(shí)不可靠。若先用藥物處理后，再以41℃加溫處理效果更佳。

4-其他方法

除了上述去除污染的方法外，還有動(dòng)物體內(nèi)接種除菌法、巨噬細(xì)胞吞噬法、污染培養(yǎng)瓶中加溴尿嘧啶再用光照射的方法及過(guò)濾法等，但均較麻煩，且效果不確定。所以一旦支原體污染，除非有特別重要價(jià)值，一般均棄之重新培養(yǎng)。

 原代細(xì)胞，癌細(xì)胞，耐藥株，抗原抗體，GIBCO血清，SERANA和BOVOGEN總代，ATCC菌種，酶免Elisa試劑盒 盡在慧穎生物

主營(yíng)產(chǎn)品之一：

豬試劑盒,豬ELISA試劑盒,酶聯(lián)免疫試劑盒

植物試劑盒,植物ELISA試劑盒,酶聯(lián)免疫試劑盒

魚(yú)類試劑盒,魚(yú)類elisa試劑盒,酶聯(lián)免疫試劑盒

鴨試劑盒,鴨elisa試劑盒,酶聯(lián)免疫試劑盒

豚鼠試劑盒,豚鼠elisa試劑盒,酶聯(lián)免疫試劑盒

兔試劑盒,兔elisa試劑盒,酶聯(lián)免疫試劑盒

山羊試劑盒,山羊elisa試劑盒,酶聯(lián)免疫試劑盒

其他試劑盒,elisa試劑盒,酶聯(lián)免疫試劑盒

牛試劑盒,牛elisa試劑盒,酶聯(lián)免疫試劑盒

綿羊試劑盒,綿羊elisa試劑盒,酶聯(lián)免疫試劑盒

馬試劑盒,馬elisa試劑盒,酶聯(lián)免疫試劑盒

駱駝試劑盒,駱駝elisa試劑盒,酶聯(lián)免疫試劑盒

鹿試劑盒,鹿elisa試劑盒,酶聯(lián)免疫試劑盒

雞試劑盒,雞ELISA試劑盒,酶聯(lián)免疫試劑盒

猴試劑盒,猴elisa試劑盒,酶聯(lián)免疫試劑盒

小鼠試劑盒,小鼠elisa試劑盒,酶聯(lián)免疫試劑盒

大鼠試劑盒,大鼠ELISA試劑盒,酶聯(lián)免疫試劑盒

人試劑盒,人elisa試劑盒,酶聯(lián)免疫試劑盒

植物病毒、細(xì)菌、真菌、植物激素和轉(zhuǎn)基因作物的農(nóng)業(yè)診斷試劑盒

動(dòng)植物疾病診斷類如豬、牛、羊、馬等家畜和禽類以及寵物類檢測(cè)試劑盒

15596026   TRIzol試劑  

15596018   TRIzol試劑  

11668027   脂質(zhì)體2000轉(zhuǎn)染試劑

11668019   脂質(zhì)體2000轉(zhuǎn)染試劑

13778075   RNAiMAX轉(zhuǎn)染試劑

17504044   B-27（黃顏色）      

12587010   B-27 （黃顏色）不含維生素A

17502048    N-2 （粉紅顏色）